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    RT-PCR的非特異信號

    發(fā)布時間: 2023-06-30  點(diǎn)擊次數(shù): 869次

    可能原因 1:引物問題(包括:引物二聚體太多)。

    解決方法:檢查引物設(shè)計(jì)環(huán)節(jié)和合成環(huán)節(jié),必要時重新設(shè)計(jì)和合成引物。

    可能原因 2:擴(kuò)增酶問題。

    解決辦法:選擇 hot start Taq 酶進(jìn)行擴(kuò)增,可提高靈敏度,增加特異性。

    可能原因 3:檢測溫度太低。

    解決辦法:在更高的溫度下檢測熒光信號。這個時候,引物二聚體已經(jīng)解鏈。


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